小鼠T淋巴细胞 （CTLL-2）

小鼠T淋巴细胞 (CTLL-2)
细胞介绍
该细胞是源自C57BL/6的细胞毒性的T淋巴细胞，其生长依赖IL-2。
 
细胞特性
1)来源：T细胞
2)形态：悬浮生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐 使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠T淋巴细胞 (CTLL-2)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，80%;补充 2mM的L-谷氨酰胺，ImM的丙酮酸钠；另外添加250U/mlrmlL-2(recombinantmouseInterleukin 2)，添加ConA的T-STIM (BDPharmingen,货号354115)，10%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细 胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应 将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细 胞吸走)，加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管 中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
 
小鼠T淋巴细胞 (CTLL-2)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。