一、植物细胞试验原理
植物的性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的才能,称为植物的性。
植物安排培育便是利用植物的性进行离体无菌植物培育的一门技术。
植物安排培育按其原始意义,便是指愈伤安排培育。但开展至今,其范围日益扩大,已包括植物和它的离体器官、安排、细胞和原生质体的离体无菌培育。
二、试验目的
植物细胞和安排培育的技术性强,要求无菌操作,通过本试验可初步掌握惯例的安排培育技术,加深对无菌操作的了解。
三.试验资料
仪器设备:1.酒精灯、三角烧瓶,培育皿;2.镊子、剪刀、剖针;3.双筒解剖显微镜;4.光照培育箱或温室;
资料烟草无菌苗、豌豆幼苗。
试剂
(1)MS培育基,植物激素:NAA、6-BA等;
(2)饱满漂液(次氯酸钠);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)无菌水
四.植物细胞试验过程
豌豆苗的茎尖培育
① 取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱满次氯酸钠溶液中消毒15分钟,(此步今后要求无菌)用无菌水中冲刷5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培育皿中。
② 在双目解剖镜下,用灭菌的解剖针剥去幼叶显露生长锥,用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥。
③ 将挑好的茎尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-苄基腺嘌呤(6-BA)的培育基上诱导愈伤安排构成,用封口膜将培育皿封好。
④ 在恒温培育箱中,26℃下,培育六周,构成愈伤安排,经继代后,可用于生根培育