1. 常用的保温方式

保温的方式除有的 ELISA 仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴。将 ELISA 试剂盒板置于水浴箱中时，ELISA 板底应贴着水面，这样能使温度迅速平衡。水浴保温的优势在于能较好地解决因受热不均衡所致的周围孔与中央孔结果的吸光度差异，也就是 “边缘效应"。

2. 避免蒸发的方法

为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。这样既能防止水分蒸发影响反应体系的浓度，又能保证反应在相对稳定的环境中进行。若用保温箱，ELISA 试剂盒应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将 ELISA 板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此，以确保反应板能够迅速达到所需的温度。

3. 反应板放置的注意事项

无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。如果反应板叠放，会导致上下层板之间的温度扩散不均匀，影响实验结果的准确性。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指 20～25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA 试剂盒只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定，这样可以更好地控制实验条件，确保每个反应都能在准确的温度和时间下进行。