大家在养细胞的时候，想必大家也一定遇到过细胞状态差这种情况，但是细胞状态差，有很多种原因造成。细胞状态很差，常常出现的现象是：细胞边缘不清晰、细胞不饱满、折光性差、背景比较脏、黑点很多、细胞碎片多（细胞凋亡后的细胞碎片）、单个细胞内有空泡（凋亡）且空泡比较多；如果细胞出现老化，也就是细胞比较扁平、增殖减缓、细胞核体积增大、细胞突触变多，此时观察到的细胞状态也是不正常的。所以，除了考虑血清和细菌污染的问题，细胞老化也不容忽视~

细胞老化的征兆：

一、细胞周期阻滞

长期的细胞周期阻滞是老化细胞的基本特征，也是体外鉴定细胞老化的指标。为了检查细胞是否跃出了细胞周期，人们通常检测增殖指示分子Ki-67的表达丰度；或者通过将与胸腺嘧啶相似的溴脱氧尿mi啶（Bromodeoxyuridine，BrdU）掺入到细胞培养基中，观察是否有新的DNA合成。细胞老化主要表现为G1期阻滞，个别情况下也可伴随G2/M期周期阻滞，或直接由G2/M期阻滞诱发形成。

二、细胞形态改变

虽然由于细胞周期的中断和DNA复制的停止，老化细胞内的DNA含量与正常细胞类似，但 RNA与蛋白质丰度均比正常细胞要明显升高。这是因为，尽管细胞进入老化阶段后蛋白质的整体合成速率降低，但是蛋白质的降解体系受到更加明显的抑制，导致蛋白质在细胞内持续堆积。但，由于不同组织来源的细胞，其形态本就各不相同，因此，目前还并无客观的、统一的标准从细胞形态判断并定义老化细胞。换句话说，目前并不能直接根据细胞的形态去判断是否老化细胞。

总结：

研究表明,衰老细胞的细胞核、细胞质和细胞膜等均有明显的变化：

①细胞内水分减少,体积变小,新陈代谢速度减慢；

②细胞内酶的活性降低；

③细胞内的色素会积累；

④细胞内呼吸速度减慢,细胞核体积增大,核膜内折,染色质收缩,颜色加深.线粒体数量减少,体积增大；

⑤细胞膜通透性功能改变,使物质运输功能降低.

如何防止细胞老化：

1. 不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降，产生细胞接触性抑制。

2. 细胞不要消化过度。采用医蛋白酶消化细胞，会造成细胞表面一定程度的细胞损伤。

3. 最重要的是使用优质的血清和培养基：干细胞对培养基中的内毒素非常敏感。除了要留意基础培养基的内毒素外，也要留意血清的内毒素。如果血清中内毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易老化或死亡，导致细胞“亚健康"状态，导致实验受到影响。很多使用者，在血清在试用前，就会通过提早审核该批次《检测报告》，以决定是否入围进行试用。

4. 在开始养细胞并传代时，也要特别注意冻存细胞，以保持细胞有种子库存在，可以有效避免细胞损伤。