问题一、在加液的时候,如果不用多道移液器,对结果有影响吗?
技术分析:对于熟练的技术人员来说,可能影响不会很大,如果不是很熟练,结果就很难说了。也正是因为如此,进口的试剂盒的说明书都要求用多道移液器或自动加样器加样。
问题二、抗原的纯度达到多少?
技术分析:如果对本底要求不是很高对化,不纯对抗原对包被影响不大,如果可以避免交叉反应的化,包被物中的一些杂质有时还可以起一定的封闭作用(但仅限于),你就先用抗原包被(采用不同稀释度),用间接法检测。
问题三、一般做组织的ELISA,做什么液体研磨组织较好?
技术分析:如果是检测组织内的成分,建议采用pH在7左右离子强度不高的缓冲液研磨就可以,这样对结果不会产生太大影响。
如果是采用研磨组织后包被,这要看你提取得成分在何种条件下能保持生物活性,建议用其保持生物活性的液体研磨,然后用pH9.6的碳酸盐缓冲液透析,如果可以对话,可直接用pH9.6的碳酸盐缓冲液。
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