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上海酶联生物如何正确选择ELISA试剂盒
更新时间:2022-08-10   点击次数:1012次


ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在实验中得到了广泛应用,然而新手们面对各种各样、动则上千种的ELISA试剂盒,内心应该是崩溃的。各种厂家、品牌,各种种属,各种参数,琳琅满目,质量良莠不齐,如何浪里淘金,选择既符合研究需求,又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢?今天教教大家如何正确找到合适的ELISA试剂盒。

1.要明确样本类型

不同厂家验证样本类型不同,即使同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本,根据样本处理方式的差异,分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆,因此购买前需仔细核对。

2.要会预测自己的目标因子的浓度

一般来说,待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围,且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6,正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL,病人会显著增高,CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。因而,必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。若浓度太低,可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大,建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒,各类型检测范围差异较大,需要根据实际情况选择合适的试剂盒。

3.检查试剂盒进行过哪些质控

质控数据在说明书中即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等,每个数据好都看一下,确保结果重现性及准确性。

4.确定需检测的因子数量

如果待测因子超过 5 个,且样本量较小时,单因子 ELISA 检测方法并不是。建议考虑多因子检测方法,如固相芯片(样本数量一般 5 个以内,检测指标可达上百个)及 Luminex 液相芯片方法(检测样本多达 80 个,检测指标多达 50 个)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。可节约样本及时间成本,也可保证检测结果准确。

5.预算评估

预算往往是大家优先考虑的,实际上,不能够一味讲究产品价格,更需要考虑性价比。生物学是极其严谨的科学,一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中的因素,即使低廉的价格,不能够重现结果,也是资源的另一种浪费。


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