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目前，分子生物学正在并终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而*的认识，其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的，它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。

较早用于免疫测定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg，这两种基因工程抗原的出现，较好地解决了抗HBc和HBe的测定问题。因为要从病毒本身去大量获取这两种纯抗原较为困难，并且这一点对于难培养的病原微生物来说，如HIV、HCV和梅毒螺旋体等都有些共性。

 一、ELISA 

  HCV目前尚不能体外培养，只能用基因工程或化学合成方法获取HCV结构和非结构区的各种抗原片断，已知HCV基因组有7个功能区组成：核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5（有分为NS5a和NS5b）区，合成抗原的优点是易于纯化，特异性好，抗原抗体反应强。

二、代抗HCV-ELISA

由美国ortho公司克隆C1003抗原几个片断与人超氧化物歧化酶（SOD）结合。用酵母从病毒基因组非结合区得到表达，表达为融合蛋白，亦作为包被固相载体。

抗原组合：NS4 区二个基因片断为NS 5-1-1和C1003

特性：IgG抗C100在发病后数月后，才检出，故不宜作早期诊断。

约由20%的病人不出现抗体。IgM抗-C100急性期检出率只有64%。

C100的抗原性较弱，在HCV复制中，不能充分暴露宿主的免疫系统。

特异性和灵敏性较差。

三、第二代HCV-ELISA试剂盒

 用基因重组的HCV结构蛋白与非结构蛋白抗原包被固相载体。

抗原组合：核心区（C区）多肽C22  NS区多肽C33  C1003和NS 5-1-1

增加C22区和C33区后，抗体出现早，有助早期诊断，提高阳性率。有利早期诊断。

C22是早期易出现病毒血症

四、第四代HCV-ELISA 试剂盒

美国新近推出一种包括HCV基因组7个功能区所有免疫决定基的单一融合蛋白，称为多决定基融合抗原，采用表面活性剂处理分界病毒表面复合物，释放HCV核心抗原      （core）并用ELISA法，灵敏度可达500拷贝/ml，已接近核酸扩增检测水平。

 抗原组合：以Core和NS3作为主要检测片断（比例十分重要）加合成多肽NS4

 特点：

① 直接测Core抗原；

②不易发生变异；

③ 抗IgM 和IgG检出率可达100%；

④ 特异性达99。8%灵敏度为100%。

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