根据前面说到的ELISA试剂盒质量控制中我们知道,由ELISA的性质和来源,分为可测误差、随机误差、人为误差。在ELISA试剂盒实验中,只有遵循它应有的规则才能更好的完成实验,对此
上海酶联生物特别为您分析了保证实验结果的几大基础:
1.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
2.实验时,要使底物避光保存。
3.用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
5.要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
6.要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
在操作步骤中,还有这几个必知项目:
1. 温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
2. 将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
3. 洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
4. 洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温6作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5. ELISA试剂盒实验中,液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
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