酶标生物ELISA试剂盒的基本原理
更新时间:2021-10-14 点击次数:1803次
酶标生物ELISA试剂盒的基本原理有哪些呢?今天小编给你详细讲解一下:
1、抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
2、抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
3、酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。
那么酶标生物ELISA试剂盒由哪些部分组成?
组成部分具体如下
1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
2、酶标记的抗原或抗体(结合物);
3、酶的底物;
4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
5、结合物及标本的稀释液;
6、洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
7、酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。