操作ELISA试剂盒能够从那些方面来挑选?
更新时间:2021-09-29 点击次数:989次
进行ELISA试剂盒时不只要办法正确,能够从那些方面来挑选elisa试剂盒?购买时也要留意。那能够从那些方面来挑选elisa试剂盒呢?接下来跟我们来具体讨论了解一下。
1、检测方式
现在检测ELISA试剂盒有许多途径,咱们能够根据自己的偏好进行挑选。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产品,抗体上结合有相应的酶,而反应体系中增加有相应的底物。这种酶促反应具有特征性的颜色,能够经过分光光度计进行检测,碱性磷酸酶ap也是一种常用酶。酶能够结合在一抗上,也能够结合在二抗上,还能够运用链霉亲和素符号的酶与亲和素符号的一抗结合。此外ELISA作用检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
2、实验类型
尽管有多种类型,不过它们都有一个共同特征,就是进行抗原捕获。一般捕获方式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。in-cell Elisa和酶联免疫斑斓elispot是两种特别的类型,in-cell Elisa需要将微孔板中培育的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检测。elispot有点像蛋白印迹western blot,先在带膜的微孔板中培育细胞,然后在膜上检测细胞分泌的抗原构成斑斓。此外,咱们还需要根据本身需要挑选96孔板或是48孔板进行Elisa实验。
3、抗体类型
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于Elisa检测,实际上有时候二者结合作用更好。例如,关于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。多抗能够确保捕获所有抗原,随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
4、交叉反应
假设抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来历所带来的兼容性就是交叉反应的一个要素。尽管现在购买源自zhi定动物的抗体越来越容易,咱们仍有必要承认一下是否会发生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行Elisa检测时,检测用的二抗必须特异性针对检测一抗,而不能与捕获抗体起反应。假设检测用二抗与捕获抗体结合,实验特异性就会大打折扣。一般咱们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗,来避免上述问题。(内容仅供参考,有问题或遇到问题请在线或lai电zi询,我们会竭诚为您服务)
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