酶联免疫试剂盒是一种敏感性高，特异性强，重复性好的试验诊断办法。由于其试剂安稳、易保存，成果判别较客观等要素，已广泛使用在免疫学查验的各领域中。酶联免疫试剂盒在国内有许多种叫法：例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

酶联免疫试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不可溅起，不可发生气泡。
 
加标本一般用微量加样器，按规则的量参加板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定需用稀释的血清，可在试管中按规则的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参加稀释液，酶联免疫试剂盒再在其间参加血清标本，然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。加酶结合物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器，使加液进程敏捷完成。在ELISA检测试剂盒中一般有两次抗原抗体反响，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完成需求有必定的温度和时刻，这一保温进程称为温育，有人称之为孵育，在ELISA中似不恰当。
 
ELISA属固相，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的时机，只要贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。这是一个逐渐平衡的进程，因而需经扩散才干达到反响的结尾。在其后参加的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育。
 
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温文4℃（冰箱温度）等。37℃是试验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在树立ELISA办法作反响动力学研讨时，试验表明，两次抗原抗体反响一般在37℃经1-2小时，酶联免疫试剂盒产品的可达高峰。为加速反响，可提高反响的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反响4℃更为*，在放射免疫测定中多使反响在冰箱中，以形成多的沉积。但因所需时刻太长，在ELISA中一般不予采用。