罗布罗布芽生菌PCR检测试剂盒操作方法:
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置规范品孔和样本孔,规范品孔各加不同浓度的规范品50μL;
3、样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,规范品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)符号的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入停止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。