1.取出ELISA试剂盒室温平衡30min,取出血样放至室温。
2.配标准品:取150uL标准品参与150uL标准品稀释液稀释,顺次稀释5次。
3.加样:分别于各反应孔中参与标准品50uL,样品40UL,标准品做复孔,样品做3孔。
4.分别于样品孔中参与10UL抗体。
5.标准品和样品孔中分别参与50uL链酶亲和素-HRP,盖上封板膜,悄然轰动混匀,37℃温育60min。
6.配洗刷液:将30倍浓缩洗刷液用蒸馏水30倍稀释后备用。
7.洗刷:留神揭开封板膜,弃去液体,甩干,每孔加200uL洗刷液,静置30s后弃去,如此重复5次,拍干。
8.ELISA试剂盒显色:每孔先参与显色剂A 50uL,再加显色剂B 50uL,悄然轰动混匀,37℃避光显色6min。
9. 中止:每孔参与中止液50uL,中止反应(此时蓝色当即转为)。
10.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加中止液10min之内进行。
11.保存效果,收拾桌面。
12.分析处理数据