1.每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好剖析.
2.显色:显色体系又许多,咱们一开始做的时分,要选择适宜的显色体系.留意显色体系酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠.
3.加抗体标本(和二抗):留意该换枪头时换枪头.标本稀释一般可用pbs稀释,也可用封闭液去稀释.如需加二抗,还要留意二抗的作业浓度,太高zao蹋,太低则着色浅.
4.洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗刷是zui首要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为抵达分离游离的和结合的酶符号物的目的,*残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的搅扰物质,在洗刷时又应把这种非特异性吸附的搅扰物质洗刷下来。所以在洗板时会有一定差错,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不*或串了孔,对如此灵敏的ELISA体系但是不小的影响。