1、培育基pH的初步调正
因培育基在加热消du过程中、pH会有所改变,培育基各成分*溶解后,应进行PH的初步调正。例如,牛肉浸液约可降低pH0.2,而肠浸液pH却会有明显的升高。因而,对这个过程,操作者应随时留意探究经验、以期能掌握培育基的终PH,确保培育基的质量。PH调整后,还应将培育基煮沸数分钟,以利培育基沉淀物的析出。
2、培育基的过滤弄清
液体培育基必须弄清,琼脂培育基也应通明无明显沉淀,因而,需要采用过滤或其它弄清方法以到达此项要求。一般液体培育基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以防止因液压不均匀而引起滤纸破裂。
3、可用清洁的白色薄绒布过滤:
亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸重复过滤。如过滤法不能到达弄清要求、则须用蛋清弄清法。即将冷却至55~60°C的培育基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超越烧瓶容量的1/2,每1000ml培育基参加1~2个鸡蛋的蛋白,强力振摇3~5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121°C加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。
4、培育基的分装
培育基的分装,应按运用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等恰当容器内。分装量不得超越容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时hao能运用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培育基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗洁净并经干烤消du,以利于培育基的*灭菌。每批培育基应别的分装20ml培育根据一小玻璃瓶中,随该批培育基同时灭菌,以为测定该批培育基终pH之用。