有位来自浙江省宁波市的谢教师问:“要怎样才能防止血清沉积物的发作?”
技术专员答道:冻结血清时,请依照所主张的逐渐冻结法(-20℃至4℃至室温),若血清冻结时改动的温度太大,试验显现十分简单发作沉积物。在冻结的一起,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,削减沉积的发作。 若有必要做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的准则,而且随时摇晃均匀。温度过高,时刻过久或摇晃不均匀,都会构成沉积物的增多。
接着,谢教师问道:“我传闻能够不做热灭活,趁着这个机会,我顺便问一下,是不是非得做热灭活啊?”
技术专员答道:试验显现,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至一般由于高温处理影响了血清的质量,而构成细胞生长速率的下降。而经过热处理的血清,沉积物的构成会显著的增多,这些沉积物在倒置显微镜下调查,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃环境中,又会使此沉积物更增多,使研究者误认为是微生物的割裂扩增。 因而我们主张您,若非有必要,您能够不需要做热处理这一步。
还有一位来自云南省丽江市的易教师问道:“在血清的冻结这一方面可难到我了,怎样冻结才能让产品的质量不受到影响呢?”
技术专员答道:我们主张您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但有必要注意的是,融解过程中有必要规则地摇晃均匀。
接着,辽宁省鞍山市的马教师问:“500ml的血清一般怎样分装?怎样保存?”
技术专员答道:保存血清的话,做好是在-5℃至-2O℃。如果是存放于4℃中,请不要超越一个月。若您一次无法用完一瓶,主张您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。规格为500ml的血清应当这样分装:
1. 预备灭菌的血清瓶
2. 慢慢冻结,*后放在室温平衡下温度。
3. 灭活:水浴锅,56℃,30分钟,而且随时摇晃均匀。取出,立即放在冰上冷却自然冷却至室温。在热灭活过程中,定时适当摇动能够削减沉积现象的发作。
4. 无菌分装 转入无菌间,在超净台内将血清分装入50-100ml血清瓶中(注意预先要将血清悄悄摇动数周、混匀;用吸液管吹出血清时要注意:不要吹出气泡封口,并于-20℃保存备用。