血清封闭就是将养殖的非免疫的正常动物采血,然后不加抗凝剂,血液凝固,血快收缩,析出的淡液体。经过特殊工艺处理后的血清,特别适在各类免疫学实验中用于封闭处理,
封闭步骤可减少一抗和二抗与非靶标位点进行非特异性结合时所产生的本底信号。理想情况是,封闭剂将占据样本中的“黏性”位点,比如暴露的带电性或疏水性蛋白表面,同时不会干扰一抗/二抗识别靶表位,从而尽可能提高信噪比(S/N)。
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。对于适用多抗的实验,二抗种属来源的正常血清是封闭处理的金标准。
生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。
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